Dulbecco's PBS i PBS

Anonim

DPBS a PBS

PBS lub sól fizjologiczna buforowana fosforanem i sól buforowana fosforanem Dulbecco (DPBS) to buforowane roztwory soli stosowane w badaniach biologicznych. PBS i DPBS są stosowane w badaniach z udziałem komórek. Stężenie jonów i osmolarność roztworu są izotoniczne, to znaczy są zgodne z ludzkim ciałem. Bufor ułatwia zapewnienie i utrzymanie stabilnego pH 7,2-7,6.

Nie ma znaczącej różnicy między PBS i DPBS. Oba zawierają fosforan sodu, chlorek sodu i, w razie potrzeby, fosforan potasu i chlorek potasu. Inne preparaty, takie jak DPBS, mogą zawierać lub nie zawierać wapnia i magnezu. PBS i DPBS mają liczne zastosowania, ponieważ nie są szkodliwe dla komórek. Zarówno PBS, jak i DPBS można używać do płukania przyrządów lub pojemników zanieczyszczonych komórkami. Oba mogą być również stosowane w rozcieńczaniu substancji. Cząsteczki wody w rozcieńczalnikach, takich jak białko, są zatrzymywane i suszone. Woda, która łączy się z substancją, powstrzymuje substancję przed zmianami konformacyjnymi, takimi jak denaturacja. Roztwory wapnia i magnezu mogą hamować aktywność trypsyny. W elipsometrii można zmierzyć adsorpcję białka, przyjmując spektrum bazowe za pomocą PBS.

Sól buforowaną fosforanem z dodatkami, takimi jak EDTA, można stosować do oddzielania złożonych komórek. Opady powstają, gdy do PBS dodaje się cynk, metal dwuwartościowy, dlatego nie można go dodawać do ogniw. Bufor Gooda jest używany zamiast cynku w tego typu sytuacjach.

Sól fizjologiczną buforowaną fosforanem i sól fizjologiczną buforowaną Dulbecco przygotowuje się na wiele sposobów. Jednym ze sposobów na jej przygotowanie jest rozpuszczenie 800 g. chlorek sodu, 20 g. chlorek potasu, 2 cząsteczki wody, 24 g. fosforan potasu i 144 g fosforan sodu w 8 L. wody destylowanej. Wynik będzie 10 litrów 10x PBS. Bezpośrednio zmierzyć pH PBS przy użyciu pehametru podczas przygotowywania buforowanych roztworów. Wartość pH roztworu można regulować za pomocą wodorotlenku sodu lub kwasu chlorowodorowego. Sól fizjologiczną buforowaną fosforanem jako rozcieńczalnik wytwarza się z końcowym stężeniem 10 mM fosforanu, 137 mM chlorku sodu, 2,7 mM chlorku potasu i pH 7,4. Fritsch, Sambrook i Maniatis mają swój własny sposób przygotowywania roztworów buforowych w swojej książce zatytułowanej "Molecular Cloning". W związku z tym, dla litra 1x PBS, rozpocząć przygotowywanie z 800 ml. wody destylowanej. Dodaj 8 g. chlorku sodu, a także 0,2 g chlorku potasu. 1,44 g. następnie dodaje się fosforan sodu, a następnie 0,24 g. fosforanu potasu. Wprowadzić kwas chlorowodorowy, aby dostosować pH do 7,4. Aby wymyślić 1 litr PBS, dodaj więcej wody destylowanej, aż do wyrównania do 1 litra. Rozcieńczyć powstały roztwór w porcję i użyć autoklawu do sterylizacji roztworu. Dostosować autoklaw do 121˚C i autoklawować przez 20 minut w cyklu ciekłym. Następnie przechowywać roztwór w temperaturze pokojowej.

Chociaż sól fizjologiczna buforowana fosforanem i sól fizjologiczna buforowana Dulbecco są przygotowywane na wiele sposobów, zawartość pozostaje taka sama. Dlatego niezależnie od tego, jak jest przygotowywany, wyniki i zastosowania są wciąż takie same.

Streszczenie:

1.PBS lub sól fizjologiczna buforowana fosforanem i sól fizjologiczna buforowana Dulbecco (DPBS) to buforowane roztwory soli stosowane w badaniach biologicznych.

2. Stężenie jonów w roztworze i osmolarność są izotoniczne, to znaczy są zgodne z ludzkim ciałem. Bufor ułatwia zapewnienie i utrzymanie stabilnego pH 7,2-7,6.

3. Nie ma znaczącej różnicy między PBS i DPBS. Oba zawierają fosforan sodu, chlorek sodu i, w razie potrzeby, fosforan potasu i chlorek potasu. Inne preparaty, takie jak DPBS, mogą zawierać lub nie zawierać wapnia i magnezu.

4. Zarówno PBS, jak i DPBS można używać do płukania przyrządów lub pojemników zanieczyszczonych komórkami. Oba mogą być również stosowane w rozcieńczaniu substancji. Cząsteczki wody w rozcieńczalnikach, takich jak białko, są zatrzymywane i suszone. Woda, która łączy się z substancją, powstrzymuje substancję przed zmianami konformacyjnymi, takimi jak denaturacja. Roztwory wapnia i magnezu mogą hamować aktywność trypsyny. W elipsometrii można zmierzyć adsorpcję białka, przyjmując spektrum bazowe za pomocą PBS.

5. Do oddzielenia złożonych komórek można użyć soli buforowanej fosforanem z dodatkami, takimi jak EDTA. Opady powstają, gdy do PBS dodaje się cynk, metal dwuwartościowy, dlatego nie można go dodawać do ogniw. Bufor Gooda jest używany zamiast cynku w tego typu sytuacjach.

6.PBS i DPBS są przygotowywane na wiele sposobów. Chociaż sól fizjologiczna buforowana fosforanem i sól fizjologiczna buforowana Dulbecco są przygotowywane na wiele sposobów, zawartość pozostaje taka sama. Dlatego niezależnie od tego, jak jest przygotowywany, wyniki i zastosowania są wciąż takie same.